化妆品体内哺乳动物细胞微核试验主要是通过检测动物骨髓或外周血红细胞中微核的形成情况，评估化妆品是否引起成红细胞染色体或有丝分裂器的损伤。微核是细胞分裂时，染色体片段或整条染色体因损伤而未能正常进入子细胞核，在细胞质中形成的圆形或椭圆形小体。通过检测动物特定细胞（如骨髓嗜多染红细胞）中的微核数量，可间接反映受试物对染色体的损伤程度，进而评估其潜在致突变风险。

　　化妆品体内哺乳动物细胞微核试验方法

　　1.实验动物：常规选择小鼠或大鼠，小鼠体重一般为25g-30g，大鼠体重为150g-200g。实验动物及实验动物房应符合国家相应规定。

　　2.剂量分组：一般取受试物LD50的1/2、1/5、1/10、1/20等剂量，以求获得微核的剂量-反应关系曲线。当受试物的LD50大于5g/kg体重时，可取5g/kg体重为最高剂量，一般至少设3个剂量。每个剂量组10只动物，雌、雄性各半。另外，还应设溶剂对照和阳性物对照组，常用环磷酰胺作为阳性物对照，剂量可为40mg/kg体重。

　　3.染毒途径和方式：染毒途径视实验目的而定，建议采用经口灌胃方式。采用30h两次给药法，即两次给受试物间隔24h，第二次给受试物后6h取材。

　　4.骨髓的制取：动物颈椎脱臼处死后，打开胸腔，沿着胸骨柄与肋骨交界处剪断，剥掉附着其上的肌肉，擦净血污，横向剪开胸骨，暴露骨髓腔，然后用止血钳挤出骨髓液。

　　5.涂片：将骨髓液滴在载玻片一端的小牛血清液滴里，仔细混匀。一般来讲，两节胸骨髓液涂一张片子为宜。然后，按血常规涂片法涂片，长度约2cm-3cm，在空气中晾干。

　　6.固定：将干燥的涂片放入甲醇液中固定5min。即使当日不染色，也应固定后保存。

　　7.染色：将固定过的涂片放入Giemsa应用液中，染色10min-15min，然后立即用1/15mol/L磷酸盐缓冲液冲洗。

　　8.封片：用滤纸及时擦干染片背面的水滴，再用双层滤纸轻轻按压染片，以吸附染片上残留的水分，再在空气中晃动数次，以促其尽快晾干，然后放入二甲苯中透明5min，取出滴上适量光学树脂胶，盖上盖玻片，写好标签。

　　9.观察与计数：先用低倍镜，后用高倍镜粗略检查，选择细胞分布均匀，细胞无损，着色适当的区域，再在油浸镜下计数。每只动物至少计数1000个嗜多染红细胞。微核率指含有微核的嗜多染红细胞数，以千分率（‰）表示之。若一个嗜多染红细胞中出现两个或两个以上微核，仍按一个有微核细胞计数。